产品货号：
RFT045
中文名称：
超低分子量蛋白Marker(3.3～22kD)
英文名称：
Ultra Low Molecular Weight Protein Marker(3.3-22kD)
产品规格：
10T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本制品包含3种多肽和2种低分子量蛋白质组成，分子量范围为3.3kD～22kD。可以用来判断SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。/p>
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| 组分 | 规格 |
| 超低分子量蛋白Marker(3.3～22kD) | 100μL |
| 说明书 | 1份 |
保存：-20℃，有效期1年。
第一次收到该产品，常温融化后，彻底混匀，离心快甩将溶液完全收集到管底。
一、制胶
- 配制分离胶
- 按照表一将不同体积的双蒸水、40% PAA（19:1）、4×凝胶缓冲液（货号:RFT231）和乙二醇加入到小烧杯中混合。
- 加入10%APS和TEMED，立即混匀5～10秒，以使溶液充分混匀。
- 在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1cm的无水乙醇，使凝胶表面保持平整。
- 静置15～30分钟，待分离胶和乙醇层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
表一（一块1mm mini胶用量）分离胶 浓缩胶 18％T,5%C/5mL 5％T,3.3%C/2mL 40% PAA（19:1） 2.25mL / 40% PAA (29:1) / 0.25mL 4×凝胶缓冲液 1.25mL 0.5mL 乙二醇（电泳级） 1.5mL / ddH2O / 1.25mL 10％APS 50μL 20μL TEMED 5μL 2μL
- 按照表一将不同体积的双蒸水、40% PAA（19:1）、4×凝胶缓冲液（货号:RFT231）和乙二醇加入到小烧杯中混合。
- 配制浓缩胶
去除覆盖在分离胶上的乙醇层，用滤纸将残留乙醇吸去。- 按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA（29:1）和4×凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。
- 加入10%过硫酸铵和TEMED，立即混匀5～10秒，以使溶液充分混匀。
- 将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
- 静置30～60分钟装待凝胶聚合。
- 按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA（29:1）和4×凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。
二、电泳
- 取Marker样品，充分混匀后备用。不要加热处理。
- 电泳前，将10×阳极缓冲液（Cat No:RFT214）和10×阴极缓冲液（Cat No:RFT227）用蒸馏水稀释成1×缓冲液备用。将电泳槽的外槽加入1×阳极缓冲液，内槽加入1×阴极缓冲液，轻柔拔出梳子，将Marker或蛋白样品（已经过2×Tricine上样缓冲液[Cat No:RFT154]处理）加入点样孔，参考下表进行电泳，至每条带都清晰可见时停止电泳。整个电泳过程大约需要2～3个小时。
注：如果电泳时间过短，染色时，指示前沿容易遮挡小于5kD的小肽。
表二：多肽电泳条件恒电压 150V 起始电流 60-75mA/板胶 结束电流 15-25mA/板胶 电泳时间 2.5～3小时
三、染色
根据常规实验步骤，用配方7和8(表三)进行染色和观察。如果使用配方7进行染色时效果不好或考虑其毒性，请选择本公司的考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液（货号：RFT054），该产品除具有染色快、无毒、灵敏性高等特点外，还能对小肽在染色中起到固定作用，不至于小肽在染色和脱色中从凝胶中脱离，是常规染色液的理想替代品。
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